特定的无菌技术

无菌处理

  • 始终用70%的乙醇擦拭手和工作区域。
  • 建议戴手套。这样可以防止任何异物在测试过程中与客户和样品接触。如果不使用手套,则**在测试之前和之后洗手。
  • 将其放入细胞培养罩之前,请先用70%的乙醇擦拭容器,烧瓶,平板和培养皿的外部。
  • 避免直接从瓶或烧瓶中倒入培养基和试剂。
  • 使用无菌玻璃或一次性塑料移液器和移液器来处理液体,并且每个移液器只能使用一次,以免造成交叉污染。除非要使用无菌移液器,否则不要拆开它们的包装。将移液器放在工作区。
  • 使用后务必盖好瓶子和烧瓶,并用胶带密封多孔板或将它们放在可转售的袋子中,以防止微生物和空气传播的污染物进入。
  • 在准备使用时,切勿揭露无菌的烧瓶,瓶,培养皿等,也不要将其暴露在环境中。完成后立即归还封面。
  • 如果要取下盖子或盖子,并且**将其放在工作表面上,则将盖子的开口朝下放置。
  • 仅使用无菌玻璃器皿和其他设备。
  • 执行无菌操作时,请注意不要说话,唱歌或吹口哨。
  • 尽快进行实验以**大程度地减少污染。

接种琼脂平板,斜坡和培养物

  • 尽可能快地进行培养物的转移,使试管和培养皿向空中开放的时间**短。
  • 通常的做法是将琼脂板打开,使其远离身体,而不要从底座上完全取下盖子。
  • 如果皮氏培养皿的盖子可能需要比平常更长的时间移除,请在本生灯燃烧器火焰附近非常近的工作以减少污染的机会。
  • 如果您经常感染带有真菌孢子的培养皿,请进一步减少吃水的机会,并考虑从琼脂表面朝下的下方接种培养皿。这样,孢子从空中沉降到板上的机会可能更少。

使用线环

  • 使用线环时,请像握住笔一样,将线环的手柄靠近顶部,并保持几乎垂直的角度。这使小指可以自由握住瓶子/试管的螺帽/棉塞。它还可以确保回路上的任何液体培养物都会掉入火焰中。
  • 在使用前后,通过在咆哮的蓝色本生灯中加热至炽热,对电线环进行消毒。这确保了污染的细菌孢子被破坏。
  • 燃烧过程应逐渐加热回路的**。这是因为使用后它将包含培养物,该培养物可能会在快速加热时飞溅,并可能释放出小的培养物颗粒,从而形成气溶胶。
  • 将电线的手柄端放在火焰的浅蓝色锥中。这是火焰中**冷的区域。
  • 将其余的电线缓慢向上拉入火焰的**热区域-紧挨着蓝锥。
  • 保持在那里直到变热。
  • 确保电线的全长受到足够的加热。
  • 让其在空气中冷却几秒钟,然后立即使用。
  • 请勿放下环圈或在周围摇晃。
  • 使用后立即重新消毒回路。

使用移液器

  • 无菌刻度或滴定(Pasteur)移液管用于转移培养物,无菌培养基和无菌溶液。
  • 从装有棉绒塞的一端将移液器从其容器/包装中取出,注意不要紧握移液器。
  • 适合奶嘴。有时将奶头先浸入无菌液体中以润滑它是有帮助的。
  • 像握笔一样握住移液管桶,但不要抓住奶头。这样,您的小手指就可以随意握住奶瓶/试管的盖子/棉塞了,而您的拇指则可以自由地控制奶头。
  • 小心地压下奶嘴,并吸收一定量的液体,该液体足以达到所需的量,但不能到达并润湿棉絮塞。
  • 用移液器**将吸头挤到液体表面下方会挤入奶嘴,气泡可能会导致“吐出”,进而形成气溶胶。为避免这种情况,请在将吸头放入液体之前先挤压乳头。
  • 然后轻轻释放压力,直到吸出所需量的液体,然后将移液器吸头从液体中提出。
  • 轻轻退回多余的东西。
  • 使用后立即将被污染的移液器放到附近的消毒剂丢弃罐中。
  • 仅在移液器在废弃锅中后才移开奶嘴,否则培养液滴会污染工作表面。

燃烧瓶子和试管的脖子

这确保了没有微生物进入容器的口中以污染培养物或培养基。使瓶口通过火焰会产生对流电流,使其远离开口,并有助于防止污染。火焰的高温部分位于内部亮蓝色“圆锥”上方,因此需要将容器移动通过火焰,而不是固定在适当的位置。

  • 松开瓶盖,以便轻松取下。
  • 用左手提起瓶子/试管。
  • 用小手curl着右手的手掌,取下瓶/试管的盖子/棉线塞。(转动瓶子,而不是盖子。)
  • 请勿放下盖子/棉线塞。
  • 向前或向后通过热的本生灯燃烧器,对瓶/试管的颈部进行火焰燃烧。
  • 完成所需的步骤(例如,撤回培养)后,用小手指将瓶盖/棉塞塞到瓶子/试管上。照顾自己!瓶子会很热。(转动瓶子,而不是盖子。)
  • 如果棉絮塞部分变形,则可以通过在推下塞塞时缓慢扭转容器的嘴部,将其更容易地引导回容器的颈部。

消毒表面

  • 对于技术人员,建议使用乙醇消毒,因为其作用迅速(约5分钟)。技术人员将更有经验,并有能力应对使用乙醇引起的火灾隐患。

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