过滤除菌操作答疑

问:最近要做一些培养基,有一些糖类需要过滤除菌,但不知道怎么操作,还需要什么辅助设备?

答:你只要有滤膜和配套的过滤器就可以了,一般在超净工作台上进行。滤膜用0.22微米或0.45微米两种规格,指的是滤膜的孔径大小吧。一般0.22就够了!

答:如果溶液的量比较大,超过500ml,可以采用已灭菌的抽滤瓶,预先垫好0.22um 的滤膜。抽滤瓶灭菌前要检查封口用纱布或棉花堵牢,使用时,不用在无菌室中进行,只要保证收集瓶无菌状态就可以。抽滤后,过滤好的溶液在无菌条件下倒进已灭菌的空试剂瓶中。

如果用小量的溶液过滤,无菌室内用一次性注射器和一次性0.22um滤膜(millipore或pall都有卖)就可以。

答:看过滤的量,如果量小,用注射器加滤器、0.22微米滤膜过滤,滤器加上滤膜后盖紧,稍旋松,饭盒密封100度蒸馏水煮沸30分钟灭菌,用来承接无菌糖水的瓶需高压。用时在无菌操作台上操作,并先旋紧滤器,注意滤器外流下去的哪怕一滴也会造成染菌;过滤应该是费力的,如果感觉很轻松,则滤膜已破。0.45微米的滤膜一般用于两次过滤的第一次,以防止0.22堵塞。注射器,若能高压更好些。

如果量大,正压可用蠕动泵接皮管接不锈钢滤器大张滤膜,这些都是要高压的。负压可用抽滤。

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